核酸蛋白測定過程其實非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除320nm的“背景”信息,設定此功能“開”。與測試核酸類似,要求A280的吸光值至少大于0.1A,佳的線性范圍在1.0-1.5之間。實驗中選擇Warburg公式顯示樣品濃度時,發現讀數“漂移”。這是一個正常的現象。事實上,只要觀察A280的吸光值的變化范圍不超過1%,表明結果非常穩定。
核酸蛋白測定主要技術指標:
1.反應時間:0.0001--9.9999秒,五位數字顯示;
2.刺激:
?。?)簡單反應時:聲音、紅光、黃光、綠光、藍光任選種;
?。?)辨別反應時:紅光、黃光、綠光、藍光任選種;
?。?)選擇反應時:紅光、黃光、綠光、藍光隨機自動呈現;
3.彩色光源:四種不同顏色光出自后面板中央同個孔,其直徑:35mm;
4.反應鍵:紅、黃、綠、藍四個鍵組成被試反應鍵鍵盤,簡單反應時僅用紅鍵;
5.反應錯誤或過早反應,錯誤警告聲響,并計錯誤次數,大錯誤次數99次,2位數字顯示;
6.反應休息間隔:選擇反應時、辨別反應時測定:1.5秒;簡單反應時測定:2--7秒隨機變化;
7.實驗次數設定:10--90次(每檔10次)或者不限,大反應次數:255次;
8.實驗結束,顯示平均反應時,對于選擇反應時可分別顯示4種刺激光的平均反應時;
9.可串口輸出實驗結果。
核酸蛋白測定允許吸光值在一定范圍內變化,即儀器有一定的準確度和精確度。還需考慮核酸本身物化性質和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測試時,離子濃度太高,也會導致讀數漂移,因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液,如TE,可大大穩定讀數。樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素:由于樣品中不可避免存在一些細小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測試效果。為了大程度減少顆粒對測試結果的影響,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值好在0.1-1.5A。在此范圍內,顆粒的干擾相對較小,結果穩定。